以下是微流控脂質(zhì)體技術(shù)的制備工藝詳細(xì)介紹：

　　1、流體聚焦法

　　原理與結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)：這是最常見的方法之一。在芯片中間通道引入含二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿（DMPC）和膽固醇的異丙醇溶液作為有機(jī)相，兩側(cè)通道則引入PBS溶液。當(dāng)三股流體在主通道聚焦時(shí)，脂-醇溶液被兩側(cè)水相擠壓并擴(kuò)散至水相形成窄的混合溶劑區(qū)。一旦混合溶劑區(qū)醇含量低于脂溶解所需的醇含量，磷脂會(huì)自組裝形成單層小尺寸球形脂質(zhì)體。

　　參數(shù)調(diào)控：脂質(zhì)體的大小可通過有機(jī)相或水相流體流速進(jìn)行精確調(diào)控，范圍通常在100–300 nm之間，且單分散性好。通過調(diào)整總流速（TFR）和流速比（FRR=水相/醇相），可以進(jìn)一步優(yōu)化粒徑及其分布。例如，增大FRR會(huì)使脂質(zhì)體的粒徑減小；而TFR的增加會(huì)導(dǎo)致脂質(zhì)體增大，尤其是當(dāng)FRR數(shù)值較小時(shí)，這種趨勢更為明顯。

　　優(yōu)勢特點(diǎn)：該方法能夠精確地控制邊界條件，按照需求調(diào)控各種物理參數(shù)；可批量制備脂質(zhì)體；獲得的脂質(zhì)體尺寸均一、大小可控；能實(shí)現(xiàn)高的包封率。為了進(jìn)一步提升控制精度，還可以采用五個(gè)進(jìn)口、三個(gè)出口的微流控結(jié)構(gòu)，使水溶性物質(zhì)直接被兩側(cè)的醇相包封，隨后形成包封水溶性物質(zhì)的脂質(zhì)體，減少包封物質(zhì)的浪費(fèi)。

　　三維流動(dòng)聚焦改進(jìn)：利用核-環(huán)形毛細(xì)管陣列平臺(tái)形成三維流體聚焦，可以顯著提高制備效率。由于多個(gè)核-環(huán)結(jié)構(gòu)毛細(xì)管組成陣列，脂質(zhì)體的制備效率是二維流體聚焦制備方法的10000倍，且制備的脂質(zhì)體尺寸可調(diào)，呈高度單分散性。這主要是因?yàn)樵谌S流動(dòng)聚焦裝置中，含脂的醇溶液能快速擴(kuò)散至水相中。

　　2、雙乳化微滴法

　　原理與過程：這是一種有效制備巨型脂質(zhì)體的方法。采用水-油-水（W/O/W）雙層微乳液滴法，油相為揮發(fā)性的有機(jī)溶劑，促使單層脂分布在水-油界面形成雙層脂膜，排列成雙層微乳，通過溶劑萃取后得到脂質(zhì)體。使用微流控平臺(tái)產(chǎn)生雙層微乳，并自發(fā)組裝成GUV（巨型單層囊泡）。通過各相流體流量可以方便地控制雙層微乳液滴的尺寸，從而得到尺寸均一、分散穩(wěn)定的雙層微乳液滴，進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為單分散的巨型脂質(zhì)體。

　　優(yōu)點(diǎn)與局限性：微流控液滴法具有更大的比表面積，相比連續(xù)流流體聚焦能夠更好地控制形成的脂質(zhì)體的大小和均一性，而且有很高的包封率。然而，以微乳為基礎(chǔ)的微流控液滴制備方法最大的缺陷是需要使用與水不相混溶的有機(jī)溶劑（包括油殘留或表面活性劑），這些溶劑通常毒性較大，較難從脂質(zhì)體體系中清除，并且可能降解活性成分，導(dǎo)致脂質(zhì)體有毒，對人體健康產(chǎn)生潛在風(fēng)險(xiǎn)。

　　3、微流控脂質(zhì)體制備的其他創(chuàng)新方法

　　交錯(cuò)人字形微混合器應(yīng)用：研究表明混合器混合單元數(shù)目和FR大小是制備納米脂質(zhì)體的關(guān)鍵因素。FR由小逐漸增加至中等數(shù)值時(shí)，混合器對納米脂質(zhì)體粒徑大小的影響比較明顯。同時(shí)第一個(gè)混合單元的位置對于制備納米脂質(zhì)體也存在一定的影響。利用交叉人字形微混合器結(jié)構(gòu)可以高通量制備由促融脂二油酰基磷脂酰乙醇胺(DOPE)和陽離子脂(2,3-二油氧基丙基)三甲基氯化銨(DOTAP)組成的單分散陽離子納米脂質(zhì)體。

　　新型微流控膜乳化技術(shù)：針對已報(bào)道的脂質(zhì)體制備方法的局限性，創(chuàng)新設(shè)計(jì)并制作了一種新型微流控膜乳化裝置，基于適合封裝核苷酸的脂質(zhì)體處方，研究處方因素和工藝參數(shù)對脂質(zhì)體形成的影響。結(jié)果表明，通過調(diào)整處方因素和工藝參數(shù)，可以實(shí)現(xiàn)脂質(zhì)體粒徑的精確控制，且所得脂質(zhì)體具有良好的穩(wěn)定性。該技術(shù)還被擴(kuò)展到藥物遞送微球平臺(tái)構(gòu)建中，以實(shí)現(xiàn)高粘度海藻酸鈣微球的均勻可控制備。

　　結(jié)合化學(xué)方法的功能化制備：將聚乙二醇（二醇）二丙烯酸酯和光引發(fā)劑的水溶液作為內(nèi)水相，含有磷脂的氯仿和正己烷的混合溶液作為中間相，以及含有表面活性劑的聚乙烯醇溶液作為外水相，利用微流控技術(shù)成功制備了乳液。以此乳液為模板，通過液滴的反浸潤過程和紫外光聚合反應(yīng)制備了含有凝膠內(nèi)核且單分散性良好的脂質(zhì)體。還可以向含有凝膠內(nèi)核的脂質(zhì)體中嵌入磁粒子，使脂質(zhì)體磁功能化，在外加磁場作用下實(shí)現(xiàn)定向遷移和定點(diǎn)釋放。